PCR实验室建设四要素

1、试剂准备区。

用于准备试剂。该区域为正压，以防止污染物溢出。该区域可分为三个区域：普通提取试剂的准备区。PCR试剂准备区和PCR主反应液准备区。在普通提取试剂的准备区准备一些核酸提取所需的裂解液和提取液;PCR试剂准备区用于制备和保存PCR试剂。例如，准备PCR试剂，如引物和探头。为了防止交叉污染，避免重复冷冻和解冻，试剂储存溶液应平均体积小，储存在该房间后使用：主反应混合物(样品除外)将用于PCR主反应液准备区。将所有PCR所需试剂的混合物添加到PCR管中的操作。重要提示：其他房间的材料(包括膨胀、模板和目标核酸或阳性对照)不得带入试剂准备区。

2、样品准备区。

该区域没有压力设置要求。该区域用于分割样品、研磨、破碎和均匀浆液的区域。因为在这些破碎、研磨和均匀浆液处理过程中会产生气溶胶，因此存在阳性样品污染后续操作的可能性。该区域应与后面的区域严格隔离，并应放置在与后面三个区域分离的独立房间中。样品准备区还可以设置专门的封闭区域或房间，用于接收和存放样品。这个房间可以放在冰箱里存放样品，应该和样品准备区的其他区域隔离。样品准备区域的人员不得进入试剂准备区域。

3、核酸提取区。

核酸提取区是从样品中提取核酸的区域。该区域为负压，以防止核酸溢出造成的污染。样品准备区还包括从样品中提取和纯化核酸的区域，以及将核酸添加到含有PCR主反应混合管的操作区域。添加样品后，应尽快覆盖PCR管的盖子。当使用PCR板和橡胶盖时，阳性控制和包含目标序列的样品应与要测量的样品分开操作，以避免添加模板时的交叉污染。

重要提示：本房间内的所有物品不得带人试剂准备区。

4、扩大和产品检测区域。

该区域用于PCR扩增和PCR分析。PER仪器被放置在这个区域。为了防止核酸溢出，房间保持负压。这个地区的人bi须一直穿工作服。

离开房间前脱下手套，防止扩增子污染其他地方。所有用于扩增和产品检测的设备都应指定用于该房间。PCR分析]di二项工作也设置在该区域，如酶切、测序、克隆等，但实验室应尽可能将这些活动与不同的区域或房间分开。降低扩增产品的污染风险。如果没有条件在该区域设置负压，则bi须在该区域设置排气装置。

重要提示：此房间的物品不能带人样品准备区或试剂准备区。